ELISA實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作之樣本收集方法

點(diǎn)擊次數(shù)：17769 發(fā)布時(shí)間：2016/4/29 14:03:58

上海極威生物科技有限公司專業(yè)生產(chǎn)各類elisa試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株等科研試劑，技術(shù)部陳技術(shù)此次為大家解說ELISA實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作：樣本的具體收集方法：

ELISA實(shí)驗(yàn)過程中，一般用來實(shí)驗(yàn)檢測的樣本類型包括血液（指血，靜脈血），尿液，糞便提取物，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間及方法和保存都各不一樣，都有一定的要求。下面來分別介紹下每個(gè)類型樣本的收集方法：

一、elisa血液樣本的采集：血液樣本分為外周血和靜脈血

采集血液樣本前，有些生理因素，如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜，如若無法避免，應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。

1．外周血的采集

外周血的采集通常取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對于燒傷病人的采集，可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測（如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等）受生理因素影響波動(dòng)過大，比較時(shí)宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項(xiàng)目（如血小板計(jì)數(shù)，出血時(shí)間或凝血時(shí)間等）的檢測，一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物，以便在減少或避免干擾因素的影響。

2．靜脈血

靜脈血的采集除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項(xiàng)目中，有些（如血糖，血脂等）受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜；有些在血中衰變較快（血清酶活性測定如ACP活性等），0~4℃貯存活性減弱也不一，這些項(xiàng)目的檢測必須及時(shí)而快速；有些（如肌酸激酶等）受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要，尤其涉及血鉀，LDH等的測定。

二、elisa尿液樣本的采集方法

尿液樣本的采集同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大，其主要的特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分（如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形）相對集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿（午餐后2小時(shí)收集的患者尿液）適用于尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性，檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)（前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液），因時(shí)間較長，細(xì)菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿（天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液）中化學(xué)物質(zhì)的定量，包括蛋白，糖，尿17-酮、17-羥類固醇，兒茶酚胺，Ca2+等，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng)，要求無菌，沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量，*少12 ml，50 ml，定時(shí)尿須全部收集，對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。

三、elisa糞便樣本的采集方法

糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(yàn)（化學(xué)法），試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑，維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。

四、腦脊液樣本的采集

腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果：如細(xì)胞變性，破壞，導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn)；有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少；細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管，管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難，全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。

五、胸腹水樣本的采集

與腦脊液標(biāo)本一樣，采集后的標(biāo)本注意安全，及時(shí)送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查，一管生化檢查，一管細(xì)菌培養(yǎng)，順序以與腦脊液相同為宜。

六、前列腺液樣本的采集

前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集，液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢，須注意防止標(biāo)本蒸干，量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。

七、精液樣本的采集

精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天，排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中，保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大，一般應(yīng)檢查2~3次（每次間隔1~2周）方可做診斷。

八、陰道分泌物樣本的采集

陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等，取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材，制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。

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