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為什么實(shí)驗(yàn)過(guò)程中孵育、洗滌需要振蕩?如何振蕩?振蕩孵育使反應(yīng)更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)專(zhuān)用96孔微孔板振蕩器。孵育過(guò)程振蕩,可以加快、加強(qiáng)抗原抗體間的相互碰撞接觸,使得反應(yīng)過(guò)程更加完全,OD值通常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過(guò)程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時(shí)可以提高試劑盒檢測(cè)的靈敏度。何時(shí)終止ELISA反應(yīng)?ELISA實(shí)驗(yàn)*終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來(lái)完成,在時(shí)間終止反應(yīng)是ELISA實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中,當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深,倒數(shù)2-3個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色開(kāi)始有淺藍(lán)色時(shí),便需要終止反應(yīng);或者也可以根據(jù)濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD值來(lái)決定,OD620=0.9-0.95之間時(shí)即可終止。
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更新時(shí)間:2024/5/24 11:46:36
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