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· 資料簡介： 11月9日報(bào)道，大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道介紹，本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大 鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）的含量。 l 有效期：6個(gè)月 l 保存條件：2-8℃ l 本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷 大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠線粒體呼吸 鏈復(fù)合物II（complex II）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測 抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在 酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。 大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，注意事項(xiàng)： 1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室 溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。 2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中 不要讓微孔干燥掉。 3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。 4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。 5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。 6. 在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞 試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。 9. 不能使用過期產(chǎn)品。 10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。 大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，試劑準(zhǔn)備：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。 大鼠線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（complex II）試劑盒ELISA使用說明書@產(chǎn)品頻道，操作步驟： 1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL； 3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL；空白孔不加。 4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙 上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。 6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 elisa試劑盒用戶：ELISA實(shí)驗(yàn)中溫育溫度有哪幾種？ 極威生物解答：溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)頂峰。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度�？乖贵w反應(yīng)4℃更為徹底，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成*多的沉淀。但因所需時(shí)間太長，在ELISA中一般不予采用。
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