聯(lián) 系 人：段煜
電 話：15214379366
手 機：16602115336
地 址：上海市崇明縣長興鎮(zhèn)潘園公路1800號2號樓9703室（上海泰和經(jīng)濟發(fā)展區(qū)）
郵 編：201913
傳 真：021-80186165
郵 箱：435399850@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c110001/
手機網(wǎng)站：m.jwswbio.com
點擊次數(shù)：564 發(fā)布時間：2022/8/4 14:46:10
· 上 傳 者： 上海極威生物科技有限公司
· 上傳時間：2022/8/4 14:46:10
· 文件大�。�47KB
· 文件類型：doc
· 所屬分類：應(yīng)用方法
· 下載次數(shù)：82次
· 查看次數(shù)：564
· 資料簡介：
活體細胞線粒體內(nèi)膜功能（膜電位）熒光測定試劑是一種旨在通過高度敏感的陽離子熒光羰花青染料結(jié)合到線粒體基質(zhì)，其熒光的增強或減弱說明線粒體膜電位的變化，即內(nèi)膜電負性的增高或降低，來分析線粒體內(nèi)膜功能的完整性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種線粒體制備物的功能檢測。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、衰老等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，活體檢測，操作極為簡易，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
陽離子熒光羰花青染色劑JC-1（5,5＇,6,6＇-tetrachloro-1,1＇,3,3＇-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide）是一種對膜電位高度敏感的染色劑。它特異性地進入線粒體，分布和結(jié)合在線粒體基質(zhì)上。線粒體膜電位的高低變化決定了JC-1的分布濃度。電位高，JC-1形成聚集體，而濃度高，熒光顯色為紅色或桔紅色；反之，則為綠色。熒光減弱表明線粒體內(nèi)膜功能受到損害。
產(chǎn)品內(nèi)容
染色液（Reagent A） 微升
稀釋液（Reagent B） 毫升
清理液（Reagent C） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存清理液（Reagent C）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；染色液（Reagent A）避免光照；有效保證6月
用戶自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于細胞脫離
完全細胞培養(yǎng)液（G&VS12052）：用于細胞脫落收集
1.5毫升離心管：用于活體細胞線粒體染色的容器
微型臺式離心機：用于細胞收集的操作
培養(yǎng)箱：用于染色孵育
（共聚焦）熒光顯微鏡：用于活體細胞線粒體熒光定性分析
比色皿或96孔板：用于熒光定量分析的容器
熒光分光光度儀或熒光酶標儀：用于活體細胞線粒體熒光定量分析
細胞流式儀：用于活體細胞線粒體熒光分析
實驗步驟
實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（Reagent A）置入冰槽里融化，稀釋液（Reagent B）放進37℃恒溫水槽里預熱。然后移出xx微升染色液（Reagent A）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升稀釋液（Reagent B），混勻后，在冰槽里靜置，并標記為染色工作液，放在暗室里。然后進行下列操作。
一、直接法
1． 準備1個12孔細胞培養(yǎng)板的待測細胞，每孔鋪滿率達70％（約30萬細胞數(shù)）
2． 小心抽去細胞培養(yǎng)液
3． 輕輕沿著孔壁加入xx毫升 清理液（Reagent C）到細胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心抽去xx毫升 清理液（Reagent C）
5． 加入xx微升含有染色液（Reagent A） 和稀釋液（Reagent B）的染色工作液，覆蓋培養(yǎng)孔表面
6． 放進37℃細胞培養(yǎng)箱里，孵育20分鐘（注意避光）
7． 小心抽去xx微升染色工作液
8． 小心加入xx微升清理液（Reagent C）（注意：檢測前置于冰槽里）
9． 即刻在倒置熒光顯微鏡下進行觀察（單濾波或雙濾波）：
二、間接法
1． 準備1個12孔細胞培養(yǎng)板的待測細胞，每孔鋪滿率達70％（約30萬細胞數(shù)）
2． 小心移出細胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管（收集懸浮細胞）
3． 加入xx毫升 清理液（Reagent C）到細胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心移出xx毫升 清理液（Reagent C）到15毫升錐形離心管（收集洗脫細胞）
5． 加入500微升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)孔表面
6． 置入37℃培養(yǎng)箱1分種
7． 輕輕抖動培養(yǎng)板，使細胞脫落，然后加入1毫升完全細胞培養(yǎng)液
8． 移入15毫升錐形離心管
9． 放進 臺式離心機離心5分鐘，速度為300g
10． 小心抽去上清液
11． 加入xx微升清理液（Reagent C）
12． 用200微升槍頭上下輕柔抽吸，混勻細胞顆粒群
13． 轉(zhuǎn)入到1.5毫升離心管或細胞流式儀專用測試管
14． 加入xx微升含有染色液（Reagent A） 和稀釋液（Reagent B）的染色工作液
15． 輕度渦旋震蕩2秒
16． 放進37℃細胞培養(yǎng)箱里，孵育20分鐘（注意避光）
17． 放進 臺式微型離心機離心5分鐘，速度為300g
18． 小心抽去上清液
19． 加入xx微升清理液（Reagent C）（注意：檢測前置于冰槽里）
上海極威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，主營產(chǎn)品有elisa試劑盒，大鼠elisa試劑盒，小鼠elisa試劑盒，動物血清，細胞株，標準品，生化試劑盒等。
實驗代做服務(wù)有酶聯(lián)免疫ELISA檢測、生化測試、液相氣相檢測、Icp-MS測試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線粒體測序、熒光定量PCR、基因克隆、定點突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù)等。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本，以市場需求為導向，以為客戶創(chuàng)造價值為己任的精神，致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設(shè)計制作，未經(jīng)允許翻錄必究.
聯(lián)系人：段煜 聯(lián)系電話：15214379366 ICP備案號：滬ICP備15046135號-2
總訪問量：4164336 管理登錄
主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒，標準品，細胞株，抗體，生物試劑，化學試劑，培養(yǎng)基，血清，實驗耗材，ABcam抗體，CST抗體，Santa抗體，ATCC細胞株，人elisa檢測試劑盒，小鼠elisa試劑盒，大鼠elisa試劑盒，牛elisa試劑盒，羊elisa試劑盒，豬elisa試劑盒，犬elisa試劑盒，植植物elisa試劑盒，elisa 檢測試劑盒報價，試劑盒批發(fā)，免費代測elisa 試劑盒，細胞株供應(yīng)商，實驗外包
掃一掃，關(guān)注我們
王小姐
