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極威生物聚乙二醇細胞融合試劑盒2022年新品主要用途
聚乙二醇細胞融合試劑是一種旨在促進實驗動物細胞合二為一的化學融合性介質和權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用的細胞種類包括老鼠細胞株、人體細胞株、胚胎細胞株、腫瘤細胞株、懸浮細胞株、植物細胞株等。應用于融合雜交瘤細胞產生抗體,腫瘤細胞和人體樹突狀細胞融合產生免疫細胞,以及人鼠細胞融合產生染色體單體等。產品嚴格無菌,即到即用,細胞低毒性,融合效率高。
極威生物聚乙二醇細胞融合試劑盒2022年新品技術背景
作為化學融合劑的聚乙二醇(polyethylene glycol),其特定的分子量能夠使細胞間或囊泡間脫水而造成細胞與細胞的緊密接觸,促使細胞膜粘合一起。聚乙二醇對細胞廣譜低毒性。它被證實是一種有效的代替病毒(Sendai)的融合劑,已成功用于植物細胞、動物細胞以及生殖細胞的融合。
極威生物聚乙二醇細胞融合試劑盒2022年新品產品內容
清理液(Reagent A)毫升
融合液(Reagent B)毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于細胞脫離
完全細胞培養(yǎng)液(G&VS12052):用于細胞培養(yǎng)
50毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
臺式離心機:用于樣品操作
75 cm2細胞培養(yǎng)瓶:用于融合細胞篩選和培養(yǎng)的容器
實驗步驟
在實施細胞融合前,要選擇好兩個帶有篩選標記的父代細胞株,例如一個帶有HPRT缺陷型(G&VS10004試劑盒)且抗生素抗性的,另一個反之。存活的細胞雜合子具有HPRT和抗生素抗性。當開始下列操作之前,先將清理液(Reagent A)、融合液(Reagent B)、用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液放進37℃恒溫水槽預熱。然后開始下列操作。
1. 在融合操作前24小時,將兩個75cm2細胞培養(yǎng)瓶里的父代細胞用胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脫離傳代一次(注意:此步驟非常重要)
2. 次日,分別抽掉兩個待融合的父代細胞培養(yǎng)瓶里(75cm2細胞培養(yǎng)瓶)的培養(yǎng)液
3. 分別加入xx毫升 清理液(Reagent A),清洗生長中的細胞表面
4. 分別抽掉5毫升清洗液
5. 分別加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面
6. 置入37℃培養(yǎng)箱3分種
7. 用手震動培養(yǎng)瓶,使細胞脫落,然后分別加入xx毫升清理液(Reagent A)
8. 充分混勻后,在血細胞計數(shù)器上進行細胞計數(shù)
9. 分別加入4 x 106的兩個父代細胞合并到一個50毫升錐形離心管
10. 放進臺式離心機離心10分鐘,速度為300g
11. 小心抽去上清液
12. 加入xx毫升清理液(Reagent A)
13. 混勻后,放入臺式離心機離心10分鐘,速度為300g
14. 小心抽去上清液,用手指輕輕彈擊直至細胞顆粒群松散
15. 加入xx毫升融合液(Reagent B),充分混勻
16. 置于室溫下1分鐘
17. 加入xx毫升清理液(Reagent A)
18. 輕輕混勻后,放進臺式離心機離心10分鐘,速度為300 g
19. 小心抽去上清液
20. 加入用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液8毫升,充分混勻
21. 移入1毫升到1個75 cm2細胞培養(yǎng)瓶里(內加20毫升完全細胞培養(yǎng)液)
各2毫升分別到2個75 cm2細胞培養(yǎng)瓶里(每個內加20毫升完全細胞培養(yǎng)液)
5毫升到1個75cm2細胞培養(yǎng)瓶里(內加20毫升完全細胞培養(yǎng)液)
22. (選擇步驟)如果需要,可以分別移入96孔培養(yǎng)板(每孔200微升)
23. 放進37℃細胞培養(yǎng)箱
24. 24小時后開始細胞篩選,直至獲得融合雜合子細胞克。10至14天)
注意事項
1. 本產品為10次操作
2. 建議嚴格按照實驗步驟進行操作,特別是融合液(Reagent B)與細胞混勻孵育時,嚴格控制孵育時間,避免聚乙二醇的細胞毒性作用,而影響融合效果
3. 所有凍存融合操作和使用工具均須在嚴格無菌狀態(tài)下進行
4. 融合操作前,務必使待融合細胞進行胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脫離傳代一次
5. 本公司提供 DMEM完全細胞培養(yǎng)液(G&VS12052)
6. 細胞篩選,通常10天后,出現(xiàn)存活的細胞克;采用96孔板可以獲得無數(shù)單一克隆
7. 本公司提供系列細胞技術試劑產品
質量標準
1. 本產品經鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產品經鑒定無病毒和支原體污染
3. 本產品經鑒定能使植物細胞、動物細胞、人體細胞、人鼠細胞等融合成功率高達95%,可獲得數(shù)百個雜合體細胞
使用承諾
極威生物秉著“信譽至上、客戶滿意、質量承諾”的宗旨為我們的用戶提供優(yōu)質產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發(fā)現(xiàn)確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯(lián)系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購信息
編號名稱規(guī)格
G&VS10002.1聚乙二醇細胞融合試劑盒10次
G&VS10002.1A清理液(Reagent A)毫升
G&VS10002.1B融合液(Reagent B)毫升
G&VS12024胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液毫升
G&VS12052 DMEM完全細胞培養(yǎng)基毫升
產品編號 | 名稱 | 規(guī)格 |
G&VS10002.1 | 聚乙二醇細胞融合試劑盒 | 10次 |
G&VS10002.2 | 電擊法細胞融合試劑盒 | 10次 |
G&VS10003 | 甲基纖維素細胞克隆試劑盒 | 10/50/80次 |
G&VS10024 | 軟瓊脂細胞克隆試劑盒 | 10/20次 |
G&VS10011.1 | 藍色熒光染色體核型分析試劑盒 | 100次 |
G&VS10035 | 免疫熒光細胞流式儀分析試劑盒 | 10次 |
更新時間:2024/5/24 11:45:35
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